Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 787-1 | ||||
Resumo:As comunidades microbianas desempenham funções no funcionamento do ecossistema dos manguezais e atuam na regulação dos principais ciclos biogeoquímicos (carbono, nitrogênio, fósforo e enxofre), mantendo assim, uma alta produtividade dos manguezais. Todavia, devido à imensa diversidade de microrganismos e à multiplicidade de interações bióticas em que estão envolvidos, continua a ser um desafio decifrar as espécies-chaves e os impulsionadores dos processos ecossistêmicos, especialmente em regiões de manguezais. Atualmente, métodos independentes de cultivo, como o sequenciamento de nova geração, fornecem uma triagem em larga escala da diversidade microbiana. Assim, novas estratégias em biotecnologia aplicada à ecologia foram desenvolvidas para análise da biodiversidade local. Uma alternativa promissora aos levantamentos taxonômicos tradicionais e aos métodos de biomonitoramento, é o uso do DNA ambiental (eDNA) através de amostras ambientais, que permite avaliar a biodiversidade e estrutura de diferentes comunidades microbianas do ecossistema. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a composição da biodiversidade bacteriana em uma área de manguezal da Baía de Aratu, Bahia, Brasil. As amostras foram coletadas em março de 2023, os locais não exibiam sinais de perturbações antropogênicas e/ou poluição. No entanto, há uma expressiva concentração industrial e portuária existente na região e entorno da Baía. Os sedimentos foram coletados em 3 áreas próximas às rizosferas (entre 5 e 10 cm camada superficial) associadas a vegetação, distando um mínimo de 1 metro de distância uma da outra, totalizando três amostras de sedimentos. As amostras coletadas foram armazenadas em tubos tipo eppendorf de 2mL, em seguida foram transferidas para o laboratório e armazenadas em ultrafreezer -80º antes da preparação do sequenciamento. Após a extração do eDNA foi feita a preparação das bibliotecas para sequenciamento de amplicons de procariotos, utilizando os oligonucleotídeos 341F e 806R específicos para a região V3/V4 do gene 16S rRNA em um protocolo de PCR de duas etapas. O pool de sequenciamento foi realizado no sistema MiSeq (Illumina, EUA), seguindo os protocolos do fabricante. As corridas paired-end foram realizadas utilizando kits de sequenciamento V2x500 ou V3x600 (Illumina, EUA). A análise dos dados genômicos foi realizada através de ferramentas de bioinformática (QIIME2 e R) e para visualização foi utilizado o KRONA. Nossos resultados totalizaram 39 filos, que foram determinados agrupando-se as sequências das amostras de sedimento das rizosferas. Os 5 principais filos observados foram: Proteobacteria, Campylobacterota, Bacteroidetes, Chloroflexi, Actinobacteria. Houve a predominância de Proteobacterias, grupo com grande diversidade metabólica e exercem um papel importante nos ciclos do nitrogênio, fósforo e enxofre, assim como na fixação de nitrogênio, na solubilização do fosfato e na redução do enxofre. Essa composição de filos por sua vez, compreende uma extensa diversidade de gêneros e que sinaliza para uma alta redundância funcional. Com prevalência do gênero Sulfurovum, bactérias oxidantes de enxofre que têm sido relatadas por conferir resistência ao estresse salino a plantas tolerantes ao sal e ocorrem em rizosfera em solo de silte costeiro. Assim, o conjunto de dados corrobora a indissociável relação habitat-microrganismo e a importância da riqueza e abundância microbiana para a manutenção, funcionamento e resiliência do manguezal. Palavras-chave: eDNA, Microbiologia Ambiental, Ecologia Microbiana, Metabarcoding, Biomonitoramento Agência de fomento:Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado da Bahia - FAPESB |